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法匹拉韋中有關(guān)物質(zhì)的HPLC法測(cè)定

ZORBAX 80Å StableBond
色譜柱性能指標(biāo)
鍵合相孔徑比表面積溫度上限 pH 范圍 封端碳載量
性能指標(biāo)只代表典型值

法匹拉韋 分析液相柱 880975-902

StableBond 色譜柱是為在低pH 條件下優(yōu)化使用而設(shè)計(jì)的。在pH 6-8，操作溫度<40ºC，且使用濃度范圍為0.01-0.02M 的低濃度緩沖液時(shí)，所有硅膠基色譜柱均可得到gao的柱穩(wěn)
定性。對(duì)于中等pH 值范圍，建議使用Eclipse XDB 和Bonus-RP。
• 低pH 范圍（低到pH 1）分離時(shí)具有長(zhǎng)的柱壽命和的重現(xiàn)性
• Zhuan利的穩(wěn)定色譜柱固定相允許其在高溫、低pH 條件下使用而不發(fā)生降解
• 六種不同的鍵合相提供了廣泛的選擇性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、
SB-C3 和SB-Aq
• 高純度（B 型）硅膠保證了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱使用Zhuan利的、的、單官能團(tuán)硅烷，其具有較大的二異丁基(SB-C18) 或二異丙基（SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SB-CN 和SB-Aq）側(cè)鏈基團(tuán)，空間位阻關(guān)鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面，以避免在低pH 條件下水解破壞。為了在酸性流動(dòng)相條件下提供良好的穩(wěn)定性并使壽命長(zhǎng)，重現(xiàn)性較好，StableBond 填料不封端。高純度、低酸度的硅膠為酸性、堿性和中性化合物提供了出色的峰形，因此使得StableBond色譜柱成為低pH 方法開發(fā)的Shou選。ZORBAX StableBond 色譜柱可與所有常用流動(dòng)相兼容，包括水含量很高的流動(dòng)相。

摘要目的: 建立測(cè)定法匹拉韋有關(guān)物質(zhì)的HPLC 法。

方法: 色譜柱為Agilent Zorbax SB-C18( 250mm × 4.6mm，5.0um) ;
流動(dòng)相為磷酸緩沖液( 取磷酸二氫鉀1． 4 g，加水至1 000 ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH 至4.0 ± 0.05) -乙腈( 90∶ 10) ; 檢測(cè)波長(zhǎng)為238 nm;
流速為1． 0 ml·min － 1 ; 柱溫為30℃，進(jìn)樣量為20L。結(jié)果: 在選定的色譜條件下，各雜質(zhì)峰與主峰分離度良好; 法匹拉韋、雜質(zhì)1、雜質(zhì)2、雜質(zhì)3、雜質(zhì)4 范圍內(nèi)與峰面積呈
良好的線性關(guān)系( r≥0． 999 6) ; 雜質(zhì)1、雜質(zhì)2、雜質(zhì)3、雜質(zhì)4 的平均回收率分別為98． 6%、97． 8%、99． 7%、100． 8%，ＲSD 分別
為1． 6%、2． 5%、1． 8%、2． 8%( n = 9) 。結(jié)論: 該方法靈敏度高、精密度好、專屬性強(qiáng)，可用于法匹拉韋有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)。

Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱
低pH 范圍（低到pH 1）分離時(shí)具有長(zhǎng)的柱壽命和醉好的重現(xiàn)性
磚利的穩(wěn)定色譜柱固定相允許其在高溫、低pH 條件下使用而不發(fā)生降解
六種不同的鍵合相提供了廣泛的選擇性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、SB-C3 和SB-Aq
StableBond 色譜柱是為在低pH 條件下優(yōu)化使用而設(shè)計(jì)的。在pH 6-8，操作溫度<40ºC，且使用濃度范圍為0.01-0.02M 的低濃度緩沖液時(shí)，所有硅膠基色譜柱均可得到醉高的柱穩(wěn)定性、高純度（B 型）硅膠保證了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱使用磚利的、的、單官能團(tuán)硅烷，其具有較大的二異丁基(SB-C18) 或二異丙基 側(cè)鏈基團(tuán)，空間位阻關(guān)鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面，以避免在低pH 條件下水解破壞。為了在酸性流動(dòng)相條件下提供良好的穩(wěn)定性并使壽命長(zhǎng)，重現(xiàn)性家，StableBond 填料不封端。高純度、低酸度的硅膠為酸性、堿性和中性化合物提供了出色的峰形，因此使得StableBond色譜柱成為低pH 方法開發(fā)的手選。ZORBAX StableBond 色譜柱可與所有常用流動(dòng)相兼容，包括水含量很高的流動(dòng)相。

法匹拉韋 分析液相柱 880975-902

在使用流動(dòng)相沖洗色譜柱后，測(cè)量甲苯的保留時(shí)間（其作為色譜柱損壞的指標(biāo)）。在極低PH (0.8) 和高溫(90°C) 條件下工作三個(gè)月后，只有StableBond SB-C18 未發(fā)生變化。ZORBAX Rx-C18 還可提供穩(wěn)定的基質(zhì)，并且可以用作StableBond SB-C18 的替代產(chǎn)品。
雙封端、密集鍵合和耐用的Rx-Sil 填料（溶膠型）相結(jié)合，與此處所用的單封端凝膠硅膠柱相比，在pH 7 條件下的壽命更長(zhǎng)。該分析所用的條件——高溫(60°C) 和高鹽濃度(250 mM)，加快了硅膠的溶解，造成溶膠-凝膠型硅膠色譜柱過(guò)早失效。
Eclipse XDB 色譜柱在較寬的pH 范圍內(nèi)有良好的穩(wěn)定性。pH 較低時(shí)，封端的Eclipse 色譜柱特別穩(wěn)定，pH 3 時(shí)與未封端的SB-C8 色譜柱的穩(wěn)定性相當(dāng)。這種色譜柱可在60ºC 用pH 3 的流動(dòng)相沖洗。然后用強(qiáng)堿性化合物測(cè)定。以確定封端或鍵合固定相是否從硅膠表面水解。在12000 倍柱體積的測(cè)試之后耦米替零(amitriptyline) 的保留時(shí)間沒有變化，說(shuō)明Eclipse XDB 色譜柱非常穩(wěn)定。在這些相同條件下，另一種封端的色譜柱顯示出較差的穩(wěn)定性。