液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過(guò)程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過(guò)程是在吸附劑表面進(jìn)行的,不進(jìn)入固定相的內(nèi)部。與氣相色譜不同,流動(dòng)相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發(fā)生吸附作用。在吸附劑表面,樣品分子與流動(dòng)相分子進(jìn)行吸附競(jìng)爭(zhēng),因此流動(dòng)相的選擇對(duì)分離效果有很大的影響,一般可采用梯度淋洗法來(lái)提高色譜分離效率。
分配色譜法
這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體,樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離,類似于萃取過(guò)程。
一般常用的固定液有β,β'-氧二(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。
例如,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應(yīng)就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不易被流動(dòng)相剝蝕。在分配色譜法中,流動(dòng)相可為純?nèi)軇?,也可以采用混合溶劑進(jìn)行梯度淋洗,其極性應(yīng)與固定液差別大一些,以避免兩者之間相溶。
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