經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的，使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代．發展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高壓和自動記錄的檢測器，克服了經典液相色譜的缺點，發展成高效液相色譜，也稱為高壓液相色譜。
分配色譜法
這種色譜的流動相和固定相都是液體，樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離，類似于萃取過程。
一般常用的固定液有β,β'-氧二(ODPN)、聚乙二醇(PEG400～4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊烷(SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法，將固定液涂漬在多孔的載體表面，但在使用中固定液易流失。目前，應用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中，固定液不是涂在載體表面，而是通過化學反應在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機基團。
例如，利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優點是不易被流動相剝蝕。在分配色譜法中，流動相可為純溶劑，也可以采用混合溶劑進行梯度淋洗，其極性應與固定液差別大一些，以避免兩者之間相溶。
液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致，但由于在液相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相，而液體和氣體的性質不相同。
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