中文名稱：牛病毒性腹瀉病毒抗體(p80)競爭 ELISA 檢測試劑盒

英文名稱：Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit

作用與用途

通過檢測牛血清樣品中的牛病毒性腹瀉病毒抗體水平。

試劑盒組成

組成成份1*96T2*96T5*96T

抗原包被板1  塊（96 孔/塊）2  塊（96 孔/塊）5  塊（96 孔/塊）

酶標抗體1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）

20X 洗滌液1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）2  瓶（60ml/瓶）

陽性對照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

陰性對照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

底物 A 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

底物 B 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

終止液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

說明書1  份1  份1  份

板貼3   張6   張15   張

操作步驟與判定

1.操作步驟

1. 1 試劑準備：20X 洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋成 1X 洗滌液（即 1 份 20X 洗滌液加入 19 份蒸餾水）。

1.2 實驗準備：取出包被板，記錄好樣本的位置。如需使用部分板條，則將需要的板條拆下進行實驗，將剩余的板條置于 2-8℃干

燥保存。

1.3 加樣/對照：分別將 20µl 待檢樣品和陰、陽性對照加入到抗原包被板孔內，其中陰、陽性對照各加 2 孔；注意每個樣品使用不 同的吸頭。

1.4 加酶：每孔加入 80ul 酶標抗體 ，輕輕振蕩混勻 ，封板后置于 37℃溫育 30 分鐘。

1.5 洗滌：棄去孔內液體 ，每孔加入 300µl 1X 洗滌液 ，洗滌 4 次 ，在最-后一次 1X 洗滌液棄去后 ，將孔中殘留的 1X 洗滌液拍干。

1.6 顯色：每孔先加入 50µl 底物 A 液 ，再加入 50µl 底物 B 液 ，輕輕振蕩混勻 ，封板后置于 37℃溫育 15 分鐘。

1.7 終止：每孔加入 50µl 終止液 ，輕輕振蕩混勻 ，測定 OD450nm波長處各孔的吸光值。

2.判定

2. 1 實驗成立條件 ：陰性對照 OD450nm 平均值-陽性對照 OD450nm 平均值≥0.3。

如果實驗結果不成立 ，有可能是實驗操作失誤造成的 ，應按操作步驟進行重復實驗。

2.2 S/N 值=    陰性對照 OD450nm 均(待測樣品 OD450nm 值)值    

2.3 結果判定 ：S/N 值≥0.3 ，判為陰性； S/N 值＜0.3 ，判為陽性。

3.注意事項

3. 1 試劑盒嚴禁凍結 ，試劑盒從 2-8℃冰箱中取出后需室溫放置 30 分鐘以上 ，完-全恢復至室溫方可使用 ，使用后應立即密封放置

2-8℃保存。

3.2 使用前需確認試劑盒有效期 ，應在有效期內使用。

3.3 所有試劑嚴禁接觸皮膚和粘膜 ，檢測結束后所用耗材按國家規定進行無害化處理。

3.4 底物 B 溶液變藍，則不能使用。

3.5 每個血清樣品 1 個吸頭 ，避免交叉污染。

3.6 待檢血清樣品數量較多時 ，應盡量縮短加樣時間。

3.7 終止反應后立即用酶標儀讀數，應在 10 分鐘內完成。

3.8 所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應滅活處理。

3.9 嚴格按照實驗操作步驟操作。

3. 10 僅用于科研或遵守當地法律法規。

規格

1*96T/盒 ，2*96T/盒 ，5*96T/盒

貯藏條件及有效期

2～8℃保存 ，有效期為 12 個月。