
本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)分離純化技術領域,具體涉及一種采用緩沖液抽提、膜分離技術純化制備人參水溶性總蛋白的方法。其是將人參粉成細粉后,加入中性緩沖液中,進行2~3次浸提,將合并的浸提液經(jīng)膜孔徑為0.22μm~0.65μm的中空纖維膜過濾后,再經(jīng)截留分子量為10~100kDa的中空纖維膜超濾,從而獲得高純度、高收率的人參總蛋白。本發(fā)明具有純化效果好、處理量大、樣品收率高且可用于放大生產(chǎn)等特點。經(jīng)BCA試劑盒測定,蛋白含量可達50%以上,且收率可達3%以上。
1、人參水溶性蛋白的分離純化制備方法,其包括如下步驟:(1). 將生曬參粉成80目~100目細粉,每克細粉加入5~10ml、含0.1~0.3mol/L NaCl、pH=7~8的0.01~0.03mol/L Tris-HCl緩沖液,進行浸提操作,合并2~3次浸提所得上清液,即為人參總蛋白粗提液;(2). 取上述步驟獲得的人參總蛋白粗提液,經(jīng)膜孔徑為0.22μm~0.65μm的過濾裝置進行微濾,流速20~40ml/min,過膜壓力5~10psi,即得人參總蛋白過濾液;(3). 取上述步驟獲得的人參總蛋白過濾液,經(jīng)膜孔徑為10~100kDa的過濾裝
置進行超濾并濃縮,流速20~50ml/min,過膜壓力10~20psi,所得內(nèi)濾液經(jīng)真空冷凍干燥即為人參水溶性總蛋白。























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