
本發明公開了一種根瘤菌胞外多糖的提取及精制方法,通過以下步驟完成:稀釋預處理、絮凝除蛋白、離子交換、濃縮除鹽、酒精醇沉和真空干燥,由本發明所述的從根瘤菌發酵液中提取和精制根瘤菌胞外多糖的方法具有工藝步驟少,效率高、成本低、適宜工業化生產的特點,而且制備的胞外多糖純度高。
一種根瘤菌胞外多糖的提取及精制方法,其特征是:由下述步驟完成:1)稀釋預處理在發酵液中加入1~10倍體積的蒸餾水,采用稀堿調溶液pH至8~10,開啟攪拌并加熱至60~80℃,并持續0.2~5小時;2)絮凝除蛋白在經稀釋預處理的根瘤菌發酵液中加入絮凝劑,然后用稀酸調整溶液pH至4~6,攪拌,當有大塊絮狀物出現時停止,采用10000g離心30~120min,收集上清液;3)離子交換上清液采用0.5~2BV速度上陰離子交換劑(Cl 型)柱,采用酚 酸法檢測多糖,
漏吸停止上柱,采用蒸餾水沖洗至無色為止,然后用2mol/L濃度的NaCl溶液洗脫,收集多糖洗脫峰;4)濃縮除鹽收集的含多糖離子交換液,采取1000~100000Da分子量的濾膜,控制過濾壓力0.3~2.8Mpa,濃縮至多糖質量濃度至15~40%時停止;5)酒精醇沉在多糖濃縮液中,緩慢加入2~4倍體積質量濃度≥95%的酒精,并采用稀酸調至pH4~7,然后降溫至 20~4℃,放置4~24小時醇沉,然后采用10000g離心30min,收集多糖沉淀物;6)真空干燥多糖沉淀置于40~70℃真空干燥箱內,控制相對真空度≥0.085Mpa,進行干燥,獲得成品。





















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