
本發明提供了一種高產堿性果膠酶制備方法,其步驟包括:出發菌株經過紫外光照誘變,初篩、復篩后得到高產堿性果膠酶菌株,將菌種保藏培養基菌種接入種子培養基中,37℃、200r/min培養12-14小時。然后將種子以8%的接種量接入發酵培養基,37℃、200r/min培養24h 后經過超濾濃縮,真空冷凍干燥后制得堿性果膠酶成品。該法操作工藝簡單,原料易得,產品質量好,生產成本低,生產過程中無污染,適合工業化生產。
一種高產堿性果膠酶制備方法,其特征包括以下幾個步驟:(1)紫外燈光誘變處理取約100ml固體斜面培養基倒入10個平板培養皿中,帶凝固后每個平板培養皿中加入0.2ml待誘變菌株的稀釋培養液,分布均勻。將平皿放于電磁旋轉器上,位于紫外燈正下方20cm處,先對平皿照射1min消毒后,打開皿蓋在功率15W,波長254nm的紫外燈光下照射90s。照射時對無菌操作臺進行遮光處理,避免可見光的影響,同時避免光復活現象。
。(2)菌種篩選初篩:從經紫外誘變處理并培養24h后的平皿中挑選出大的獨立的菌落于初篩培養基中,放入37℃培養箱中培養24h,得到數百個菌落,在菌落周圍加入幾滴1%的十六*二*,靜置10min,若有透明圈產生則為堿性果膠酶產生菌。復篩:將初篩得到的若干菌落接種于斜面培養基,37℃培養24h后,接種到搖瓶進行一級發酵,37℃,200r/min,25h后對發酵液進行酶活測定。選擇一株產酶活力*高的菌株接種于菌種保藏培養基。(3)液體種子培養將菌種保藏培養基菌種接入種子培養基中,37℃、200r/min培養12?14小時;裝液量為250ml,三角瓶中裝25ml培養基。(4)發酵培養將種子以8%的接種量接入發酵培養基,37℃、200r/min培養24h;裝液量為500ml,三角瓶中裝50ml培養基。(5)堿性果膠酶精制發酵完畢后加入聚丙烯酰胺作絮凝劑,升溫至35℃,攪拌0.5h。之后對發酵液進行超濾濃縮,使體積濃縮4?5倍,濃縮液在緩慢攪拌下緩緩加入酒精,繼續攪拌10min,靜置沉淀數小時 后真空冷凍干燥,烘干制得堿性果膠酶成品。





















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