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色譜分析法是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)及生化工程領(lǐng)域的分離方法，高度選擇性的工藝可以分離出物理化學(xué)性質(zhì)極為相似的成分，這在工藝過(guò)程及過(guò)程分析中很重要。

BE2系統(tǒng)是一種工業(yè)上非常重要的色譜法，即低壓液相色譜法，其中包括離子交換法、尺寸排斥法、疏水相互作用法和親和層析法。每種類(lèi)型都使用不同的分離方法，分別是:粒子電荷、粒子大小和形狀、分子疏水性和生物特異性。BE2包括詳細(xì)的尺寸排斥色譜實(shí)驗(yàn)程序，特別是在分離蛋白質(zhì)和染料方面。同時(shí)也可以用于研究其他類(lèi)型的低壓液相色譜。

尺寸排斥色譜法使用多孔球體來(lái)分離不同尺寸的顆粒，球體上小孔的粒徑范圍決定了顆粒是全部排阻還是部分排阻或是進(jìn)入球體，排阻的顆粒在色譜柱體中的停留時(shí)間最短，進(jìn)入球體中的顆粒在柱體中停留時(shí)間最長(zhǎng)。部分排阻的顆粒停留時(shí)間介入二者之間。通過(guò)這種方法，不同粒徑的顆粒即被分離。




指導(dǎo)功能

?理解液相色譜法的原理及練習(xí)，包括如下內(nèi)容：

色譜柱填料

樣本應(yīng)用

色譜柱層析

分析及成分收集器

?理解影響分離的因素

?理解通過(guò)紫外分光光度法測(cè)量蛋白質(zhì)濃度的方法




詳細(xì)功能

詳細(xì)的教學(xué)練習(xí)包括向?qū)W生演示大小排除(凝膠過(guò)濾)色譜法的重要方面。提供的信息包括合適的凝膠基質(zhì)、緩沖液、蛋白質(zhì)等細(xì)節(jié)和深入的實(shí)驗(yàn)協(xié)議。雖然實(shí)驗(yàn)僅涉及尺寸排斥色譜法，但該系統(tǒng)適用于離子交換、親和作用和疏水作用等其他低壓液相色譜系統(tǒng)。該系統(tǒng)包括一個(gè)用于在線測(cè)量蛋白質(zhì)濃度的紫外流動(dòng)單元。檢測(cè)水平為 mg/ml的蛋白(牛血清白蛋白)。

?了解低壓液相色譜系統(tǒng)的操作規(guī)程

?使用染料進(jìn)行尺寸排斥色譜的可視化演示

?確定流速和色譜柱長(zhǎng)度對(duì)產(chǎn)品分離和濃縮的影響

?根據(jù)蛋白質(zhì)分子量校準(zhǔn)色譜柱，并測(cè)定未知蛋白質(zhì)的分子量




描述

BE2由一個(gè)臺(tái)式裝置組成，在其上安裝兩個(gè)長(zhǎng)250毫米、直徑10毫米的硼硅酸鹽玻璃色譜柱。兩者都配有可調(diào)的端部件，以允許不同的床高進(jìn)行調(diào)查。在每個(gè)柱的頂部都有隔膜注射器，允許將樣品引入柱表面。該柱是由一個(gè)3通道蠕動(dòng)泵8輥設(shè)計(jì)，以提供平穩(wěn)的流量。該泵具有變速驅(qū)動(dòng)和廣泛的管孔可以使用，從而提供一個(gè)非常廣泛的流量范圍。開(kāi)關(guān)閥允許操作者輕松地選擇所需的操作列。在塔的入口之前安裝一個(gè)氣泡捕集器，以防止空氣進(jìn)入。從該柱的出口通過(guò)到紫外光學(xué)流動(dòng)單元，用于在線測(cè)量樣品洗脫。流出流動(dòng)單元的液體既可以引導(dǎo)流出，也可以使用成分收集器收集。成分收集器是定時(shí)器控制的，它可以容納48根3毫升的試管。

為了保護(hù)色譜柱，必須對(duì)所有引入色譜柱的緩沖液和樣品進(jìn)行過(guò)濾和脫氣。所需設(shè)備為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，但如果需要，也可以選擇BE2 -1。BE2-1由濾膜架、保溫瓶、真空泵和濾膜組成。樣品過(guò)濾系統(tǒng)由注射器和一次性膜過(guò)濾器組成。樣品注射器和針頭也包括在內(nèi)。




液相色譜所需要的方法確實(shí)需要一些實(shí)踐，以達(dá)到可重復(fù)的結(jié)果。因此，對(duì)于沒(méi)有這方面經(jīng)驗(yàn)的用戶(hù)，建議提供培訓(xùn)。







可選附件

BE2-1：緩沖過(guò)濾除氣系統(tǒng)由濾膜架、保溫瓶、水真空泵和濾膜組成。樣品過(guò)濾系統(tǒng)由注射器和一次性膜過(guò)濾器組成。樣本注射器和針頭。

必要配件

軟件要求配備計(jì)算機(jī)（不提供），需安裝Windows98,2000，XP及以上的系統(tǒng)，并帶有USB接口。

化學(xué)藥品

提供的化學(xué)品有:尺寸排除凝膠(Sephadex G-100)、藍(lán)葡聚糖和酚紅。實(shí)驗(yàn)中使用的蛋白質(zhì)和12不供應(yīng)，但可以從化學(xué)供應(yīng)商獲得。

設(shè)備需求

單相電

BE2-A 220/240V/1ph/50Hz 10A

BE2-B 120V/1ph/60Hz 15A

BE2-G 220V/1ph/60Hz 10A




總尺寸

高：

寬：

深：

裝運(yùn)規(guī)格

體積：3

總重：36kg

輔助設(shè)備

BE1:間歇式酶反應(yīng)器

CEU:催化反應(yīng)器

UOP12:過(guò)濾裝置

W8:厭氧消化池

W11:好氧消化池

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