β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纖維二糖酶測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化β-糖苷鍵水解,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,釋放HCN,從而防止昆蟲取食。測定原理:
β-GC分解對-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基,后者在400nm有 吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算β-GC活性。粗酶液提取:
1、培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10
的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、培養(yǎng)液、血清(漿)等液體樣本:直接檢測。
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