丙酮酸(PA)含量測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
丙酮酸通過乙酰CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。測定原理:
丙酮酸與2,肼作用,生成丙酮酸-2,腙,在堿性溶液中呈顯色。需自備的儀器和用品:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、蒸餾水。
丙酮酸提取:
1、培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議500 萬或細胞加入1mL 提 取液),超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30 次),靜置30min, 8000g,25℃離心10min,取上清待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置30min,8000g,25℃離心10min,取上清待測。3、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建
議取0.1mL 血清(漿)加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置30min, 8000g,25℃離心10min,取上清待測。
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