一氧化氮NO含量測試盒
測定方法: 分光光度法測定規格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內神經、循環、呼吸、消化、泌尿生殖等系統中,特別是神經組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內的信息物質,發揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理:
NO在體內或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)
樣品處理:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
2.按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
3.體液和培養液等其它液態樣品:直接測定。
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