傾斜單平面照明顯微鏡是為活細胞成像設計的斜平面照明顯微鏡,非常適合對蓋玻片上的活細胞或其它樣品快速溫和地光片顯微成像。
傾斜單平面照明顯微鏡是一個單視圖光片顯微鏡成像系統,光片采用樣品培養皿下的浸油物鏡以一個傾斜角度發生,采用高數值孔徑NA浸水物鏡從頂部觀察熒光發射,物鏡傾斜60度的角,垂直于照明光片。在樣品盤的上方和下方都設置了高數值孔徑NA物鏡 這使得細胞培養工作中以方便的幾何結構高分辨率成像。
傾斜單平面照明顯微鏡是二合一顯微鏡。較低的顯微鏡采用傳統模式用于熒光成像,例如寬場熒光成像、共聚焦成像、或者TIRF全內反射熒光成像,它也被用來作為光片激發物鏡。頂部的傾斜顯微鏡則致力于光片成像。

傾斜單平面照明顯微鏡特點
低光漂白:比共聚焦顯微鏡和碟片式共聚焦顯微鏡光漂白小10倍
浸水式物鏡-發射物鏡產生280納米橫向分辨率(NA高達1.1);
快速三維成像:蓋玻片上傾斜光片成像,成像速度高達200片/秒
常規樣品存放,樣品放在細胞培養皿中
功能齊全的常規熒光顯微鏡和光片顯微鏡二合一功能
模塊化和靈活

傾斜單平面照明顯微鏡規格參數
| 視場 | >250μm(對角) |
| 分辨率 | 280nm @XY軸,-670nm@Z軸,500nm波長 |
| 樣品尺寸 | 適用于薄而透明的樣品,如蓋玻片上細胞或組織培養物
|
| 說明 | 上述指標受到物鏡和相機影響,上述數值是采用60倍NA1.1物鏡和sCMOS相機測量。 |
| 安裝 | 直徑35毫米或更大的培養皿、蓋玻片 |
| 成像深度 | 受到散射限制,通常30-150微米,取決于樣本 |
| 軟件 | 各種免費開放的資源和專有的 |
| 孵化 | 25-40攝氏度,CO2和濕度控制(其它功能可商談) |
| 兼容相機 | 任何帶有外觸發器的sCMOS |
| 成像采樣模式 | 同步,層析切片成像,壓電成像,位移臺掃描成像,固定光片 |
| 兼容激光 | 任何帶有TTL 控制的激光器 |
| 多點采集成像 | 任意組合:時間點、多位置、多顏色(最多四種) |
傾斜單平面照明顯微鏡oSPIM系統配置
傾斜單平面照明顯微鏡oSPIM可采用ASIIMAGING公司RAMM框架模塊化顯微鏡系統搭建。這種特殊的硬件是頂部顯微鏡以60度角度安裝到RAMM框架上。底部的顯微鏡包括一個標準的落射熒光通路和掃描器一起產生光片,方便集成TIRF顯微鏡或者共焦顯微鏡。
我們提供傾斜單平面照明顯微鏡oSPIM系ASI制造所用到的所有光學機械,移動光片,2D掃描鏡和壓電物鏡移動器,并提供物鏡、激光器和科研型CMOS相機,用戶使用者可以自己購買其它器件。
由于光片數據只來自一個物鏡,相關的后處理量較小且和傳統方式一樣。這與雙側導致平面照明顯微鏡diSPIM形成了對比,后者各向同性視圖的數據分析常常需要更高技術。權衡的結果這種傾斜單平面照明顯微鏡的分辨率不是同向性的。
與共焦或者其它形式的表熒光相比較,光片數據集傾斜30w.r.t.蓋玻片允許樣品不同角度的視圖,成為其一個優點。
我們還可以提供雙視圖傾斜SPIM顯微鏡,其中底部物鏡也是傾斜的。這種配置不提供常規倒置顯微鏡的功能。它需要特殊的樣本支架和兩套照相機和掃描儀。它的優點是通過兩個近正交視圖合并成一個高分辨率視圖圖像,從而提高了分辨率,就像diSPIM顯微鏡所做的那樣。硬件可用于上層成像目標安裝到大多數的商業倒置顯微鏡上(客戶需要適當的將ASI掃描儀連接起來以生成光片)。
傾斜單平面照明顯微鏡主要技術變化
1.使用倒置顯微鏡處理圖像和照片
2.底部顯微鏡實現TIRE全內反射熒光顯微鏡照明
3.用柱面透光鏡代替高斯掃描器
傾斜單平面照明顯微鏡技術介紹請看:



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