河源高效過濾器：冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團菌檢驗方法本附錄規(guī)定了集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水及其形成的沉積物、軟泥等樣品中嗜肺軍團菌的檢驗方法。
A1原理
待測水樣經(jīng)過濾膜或離心濃縮后，中效過濾器一部分樣品經(jīng)酸處理與熱處理，以減少雜菌生長，一部分樣品不作處理。將上述處理與未處理樣品分別接種BCYE瓊脂平板并進行培養(yǎng)，生成典型菌落并經(jīng)生化培養(yǎng)和血清學(xué)實驗鑒定確認(rèn)則判定為嗜肺軍團菌。
A2主要儀器設(shè)備
平皿：90mm
培養(yǎng)箱：35~37℃
紫外燈：波長360±2nm
濾膜濾器
濾膜：孔徑～μm
蠕動泵
離心機
渦旋振蕩器
普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、體式鏡
0水浴箱
A3采樣中效過濾器

采樣容器：可選擇玻璃瓶或聚乙烯瓶，沉積物與軟泥需用廣口瓶，容器均需螺口或磨口，用前滅菌。
采樣量：每個采樣點依無菌操作取水樣（或沉積物、軟泥等樣品）約200ml。
中和：經(jīng)氯或臭氧等消毒的樣品，采樣容器滅菌前加入溶液以中和樣品中的氧化物。
樣品運輸與貯存：樣品2天內(nèi)送達實驗室，不必冷凍，但要避光和防止受熱，室溫下貯存不得超過15天。
A4 中效過濾器方法與步驟
樣品處理
.1沉淀或離心：如有雜質(zhì)可靜置沉淀或1000r/min離心1min去除。
.2過濾：將經(jīng)沉淀或離心的樣品通過孔徑～μm濾膜過濾，取下濾膜置于15ml滅菌水中，充分洗脫，備用。
.3熱處理：取1ml洗脫樣品置50℃水浴加熱30min。
.4酸處理：取5ml洗脫樣品，調(diào)pH至，輕輕搖勻，放置5min。
接種與培養(yǎng)：取.2洗脫樣品、.3熱處理樣品及.4酸處理樣品各，分別接種GVPC平板。將接種平板靜置于CO2培養(yǎng)箱中，溫度為35~37℃，CO2濃度為%。無CO2培養(yǎng)箱可采用燭缸培養(yǎng)法。觀察到有培養(yǎng)物生成時，反轉(zhuǎn)平板，孵育10天，注意保濕。

觀察結(jié)果：軍團菌生長緩慢，易被其它菌掩蓋，需每天在體式鏡上觀察。軍團菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍色或紫色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色；菌落整齊，表面光滑，呈典型毛玻璃狀，在紫外燈下，有熒光。
菌落驗證：中效過濾器從每一個平皿上挑取2個可疑菌落，接種BCYE和L－半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板，35~37℃培養(yǎng)2天，凡在BCYE瓊脂平板上生長而在L－半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長的則為軍團菌菌落。
嗜肺軍團菌型別的確定：應(yīng)進行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實驗確定嗜肺軍團菌。生化培養(yǎng)：氧化酶（－/弱+），硝酸鹽還原－，尿素酶－，明膠液化＋，水解馬尿酸。血清學(xué)實驗：用嗜肺軍團菌診斷血清進行分型。