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抗體操作過程注意事項(xiàng):
1、熱處理后應(yīng)注意自然冷卻。
2、熱處理時(shí)要防止切片干燥。
3、應(yīng)根據(jù)不同的抗體選擇合適的抗原修復(fù)方法。
4、同一批抗原的檢測所用溫度和時(shí)間確保一致。
5、注意形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的改變(一般經(jīng)高溫修復(fù)后胞漿會(huì)明顯被破壞,對細(xì)胞核的影響較大,會(huì)出現(xiàn)核破裂與蘇木到淡染等現(xiàn)象;而經(jīng)酶水解的切片,其細(xì)胞漿破壞視消化時(shí)間長短而異,但核破壞較輕)。
6、如果在常用的緩沖液中無法實(shí)現(xiàn)抗原修復(fù),或經(jīng)修復(fù)后的抗原定位發(fā)生改變,可改用一些不常用的緩沖液,或加一些螯合劑,如EDTA等可改善某些抗原的修復(fù)。
用于免yi 酶組織化學(xué)抗原修復(fù)的消化酶很多,所選酶的種類、使用的濃度、pH、消化時(shí)間及溫度等均要視組織固定的不同,所檢測抗原的性質(zhì)與組織類型的不同而異,應(yīng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索確定。