反相色譜在高效液相色譜儀中是應(yīng)用廣泛的技術(shù)主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和離子化合物大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的。
反相柱分析物和固定相的基質(zhì)污染可在使用期間受到影響，應(yīng)注意的是，固定相逆變器的特殊性質(zhì)可與由柱壓污染問題分析物相互作用的是結(jié)果在分離檢測(cè)過程因子反相柱污染有哪些呢？
（1）在高效液相色譜儀反相色譜柱上有自己很多不同填料主要包括一些聚合物聚合物材料表面涂上硅膠和氧化鋁，無機(jī)－有機(jī)混合物涂層氧化鋯和石墨化碳都存在于我們這些鍵合硅膠上,為增加一個(gè)反相色譜柱的應(yīng)用常利用企業(yè)各種社會(huì)流動(dòng)相和添加物作用于反相色譜柱添加物,可以通過改變或修飾填料的表面工作有時(shí)候甚至可能會(huì)造成污染鍵合相表面硅膠表面的疏水鍵合相是硅烷醇?xì)埩舻墓柰榇即嬖谟谒械墓枘z鍵合填料中對(duì)于這些硅烷醇具有弱酸性，因此他們能與某些待分析物反應(yīng)能力成為基質(zhì)細(xì)胞成分。
（2）樣品中含有的鹽、脂質(zhì)、含脂物質(zhì)、腐質(zhì)酸、疏水蛋白質(zhì)和其它一些物質(zhì)是一些可能在使用時(shí)與HPLC柱發(fā)生相互作用的物質(zhì)部分非常疏水的樣品基質(zhì)，如玉米油，高芳香物質(zhì)和蠟?zāi)苷匙」潭ㄏ嘌b填表面并且改變其性質(zhì),含有蛋白質(zhì)物質(zhì)的生物流體也能吸附在填料表面。有些物質(zhì)有比待測(cè)物或少或大的保留值，那些保留值較小的物質(zhì)如鹽類一般來說在空體積時(shí)就被沖出色譜柱，這些非目標(biāo)產(chǎn)物的被檢測(cè)器檢測(cè)到而且能形成色譜峰,氣泡,基線上移或者是負(fù)峰如果樣品成分在柱子中有很強(qiáng)的保留而且流動(dòng)相溶液成分不足以把這些物質(zhì)洗脫下來多次上樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會(huì)積累在柱頭這些行為通常只有通過平行實(shí)驗(yàn)才能發(fā)現(xiàn)有著中等保留值的樣品能被緩慢洗出而且表現(xiàn)為寬峰，基線擾動(dòng)，或者基線漂移。
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