1、載體根據消毒對象選擇相應的材料，如手術器械選擇不銹鋼片，物體表面選擇棉布片，非金屬管腔選擇聚四氟乙烯片（管），光滑表面可選擇玻璃片等。常用的材料有金屬、玻璃、濾紙、棉布、聚四氟乙烯等，金屬載體一般用 12mm 直徑圓形金屬片（厚 0.5mm），其他材質載體一般為方形，大小 10mm×10mm，特殊試驗可使用其他材質、形狀的載體。評價氣體、霧化等消毒方式時，不可使用布片和濾紙片等有吸附能力的載體。
2、所用載體（除濾紙片外）于染菌前，進行脫脂處理。脫脂方法如下：①將載體放在含堿性洗滌劑的水中煮沸 30min；②以自來水洗凈；③用蒸餾水煮沸 10min；④用蒸餾水漂洗至 pH 呈中性；⑤晾干、熨平備用。
3、布片用 40織紗的白平紋棉布制作。將脫脂后的布塊按載體規定的大小抽去邊緣一周的經緯紗各一根，按抽紗痕剪開。金屬片以不銹鋼制作，紙片以濾紙制作。
4、 載體經壓力蒸汽滅菌后，使用滴染法染菌。
5、 染菌用菌懸液：菌懸液和芽孢懸液的制備按上述6進行，然后加入等量 3.0% 或 0.3% 的牛血清白蛋白。
6、 滴染法染菌時，將經滅菌的載體平鋪于無菌平皿內，用移液器逐個滴加菌液，必要時用接種環涂勻整個載體表面。置 36℃±1℃ 恒溫培養箱或者室溫干燥備用，黑曲霉菌染菌載體置于內干燥備用。
7、 每個染菌載體的回收菌量為 1×106CFU/個～5×106CFU/個。特殊染菌載體（如壓力蒸汽滅菌生物指示物）的回收菌量符合相應標準的要求。
8、 染菌載體冷藏保存，芽孢載體有效期1個月，其他染菌載體當天使用。
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