膠體金,是金的一種存在狀態,是氯金酸在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液。免疫膠體金技術是以膠體金為標志物,利用特異性抗原抗體反應,在光鏡電鏡下對抗原或抗體物質進行定位,定性乃至定量研究的標記技術。
免疫膠體金的技術原理
膠體金標記,實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程,吸附原理:(1)金粒子所帶的負電荷與蛋白內的氯基酸所帶的陽性電荷的zui初的相互吸引;(2)蛋白通過某些氨基酸殘基包括與金粒子表面之間的疏水吸附作用,儀,(3)蛋白中的半的硫基與金粒子間的配價結合。
膠體金的制備及質量鑒定
膠體金基本都是有氯金酸還原而成,常用的還原劑有檸檬酸三鈉,抗壞血酸.白磷.等各種有機或無機化合物,根據還原劑的性質和濃度不同,可制備各種粒徑的膠體金懸液,還原劑的濃度和還原力越高,所合成的膠體金顆粒就越小。常制備的的金粒徑大小都在5-150nm范圍,診斷進監測用金鈪合物的顆粒直徑大多在20-40nm大小,在膠體金與蛋白質偶聯的過程中金顆粒的品質起著決定性作用,如果應用劣質的膠體金用于標記直接影響試紙條的靈敏度,穩定性和特異性,因此膠體金讀數儀廠家提醒在標記前可應用透射電鏡對膠體金顆粒的結構進行評價,也可以通過顏色來判斷金溶液的質量,常用的20-40nm的金顆粒呈深紅色,吸收波長為530nm。