的提煉

提純工藝流程如圖5-1所示。

圖5-1提純工藝流程

不穩(wěn)定，發(fā)酵液預(yù)處理、提取和精制過程要條件溫和、快速，防止降解。

（1）預(yù)處理

發(fā)酵液形成后，目標(biāo)產(chǎn)物存在于發(fā)酵液中，而且濃度較低，如抗生素只有10~30kg/nm*，含有大量雜質(zhì)，影響后續(xù)工藝的有效提取。因此必須對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理，其目的在于濃縮目的產(chǎn)物，去除大部分雜質(zhì)，改變發(fā)酵液的流變學(xué)特征，利于后續(xù)的分離純化過程。

（2）過濾

發(fā)酵液在萃取之前需預(yù)處理，發(fā)酵液加少量絮凝劑沉淀蛋白質(zhì)，然后經(jīng)真空轉(zhuǎn)鼓過濾或板框過濾，除掉茵絲體及部分蛋白質(zhì)。易降解，發(fā)酵液及濾液應(yīng)冷卻至10℃以下，過濾液收率般為90%左右。

①若菌絲休粗長(zhǎng)，可采用鼓式真空過濾機(jī)過濾，濾盜形成緊密餅狀，容易從濾布上刮下。濾液pH為6.27~7.2，蛋白質(zhì)含量為0.05%~0.2%，需要進(jìn)步除去蛋白質(zhì)。

②改善過濾和除去蛋白質(zhì)的措施：硫酸調(diào)節(jié)pH為4.5~5.0，加入0.07%溴代十五烷吡啶（PPB），0.7%硅藻土為助濾劑。再通過板框式過濾機(jī)。濾液澄清透明，進(jìn)行萃取。

（3）萃取

的提取采用溶媒萃取法。游離酸易溶于有機(jī)溶劑，而鹽易溶于水。利用這性質(zhì)，在酸性條件下轉(zhuǎn)入有機(jī)溶媒中，調(diào)節(jié)pH，再轉(zhuǎn)入中性水相，反復(fù)兒次萃取，即可提純濃縮。選擇對(duì)分配系數(shù)高的有機(jī)溶劑，工業(yè)上通常用乙酸丁酯和戊酯，萃取2~3次。從發(fā)酵液萃取到乙酸丁酯時(shí)，pH選擇為1.8~2.0。從乙酸丁確反萃取到水相時(shí)，pH選擇為6.8~7.4，發(fā)酵濾液與乙酸丁酯的體積比為（3.5~4.0）：1。反萃取時(shí)，BA萃取液與溶液的比例為（4~5）：1。幾次萃取后，濃縮10倍，濃度幾乎達(dá)到結(jié)晶要求。萃取總收率在85%左右。

所得濾液多采用二次苯取，用10%硫酸調(diào)pH為2.0~3.0，加入乙酸丁酯，用為濾液體積的四分中的員，反萃取時(shí)常用溶液調(diào)pH為6.8~7.2，在次丁酯萃取時(shí)，由于濾液含有大量蛋白，通常加入破乳劑防止乳化。次萃取因存在蛋白質(zhì)，要加

0.05%~0.1%乳化劑PPB。

萃取條件：為減少降解，整個(gè)萃取過程應(yīng)在低溫下（10℃以下）進(jìn)行。萃取罐用冷凍鹽水冷卻。

（4）脫色

萃取液中添加活性炭，除去色素、熱源，過法，除去活性炭，

（5）結(jié)晶

萃取液般通過結(jié)晶提純。鉀鹽在乙酸丁酯中溶解度很小，在二次丁酯萃取液中加入錯(cuò)酸鉀-乙醇溶液，鉀鹽就結(jié)品析出。然后采用重結(jié)品方法，進(jìn)步提高純度，將鉀鹽溶于KOH溶液，調(diào)pH至中性，加無水丁醇，在真空條件下，共沸蒸餾結(jié)晶得純品。直接結(jié)晶：在2次乙酸丁隋萃取液中加*-乙醇溶液反應(yīng)，得到結(jié)晶鈉鹽。

加-乙醇溶液，得到鉀鹽。

共沸蒸餾結(jié)晶：萃取液，再用0.5mol/LNaOH萃取，pH為4.8~6.4時(shí)得到鈉鹽水濃縮液。加2.5倍體積丁醇，于16~26℃，0.67~1.3kPa下蒸餾：水和丁醇形成共源物而蒸出，鈉鹽結(jié)晶析出。結(jié)晶經(jīng)過洗滌、干燥后，得到青待素產(chǎn)品。

金）