1菌種的培養發酵以及提取-1的生產

、1菌種的培養

脫氮假單胞菌和薛氏丙酸桿菌是目前工業應用廣的：產生菌，其中丙酸菌是兼性厭氧菌。以薛氏丙酸桿菌發酵生產1：為例，該類菌株采用兩階段發酵法：階段采用厭氧培養，在厭氧培養階段，菌體內生成大量咕啉醇酰胺；二階段采用通氣培養，在需氧培養時，此化合物又轉變成.：。如在厭氧培養階段添加5，6-二并咪唑（化學合成），則可省去需氧培養階段，進而縮短發酵周期。

1.斜面種子培養

取低溫保藏的薛氏丙酸桿菌，接種于斜面培養基上，30℃培養4d。

2.種子培養

將斜面培養物以挖塊接種的方式，接種到種子搖瓶中，30℃靜置培養2d。

3.二種子培養

將種子培養液以3%（體積分數）的接種量接種于滅菌后的種子罐中，于30℃不通氣培養24h（用氨水維持pH為6.5）。

4.發酵培養

將生長良好的二種子液以2%（體積分數）的接種量接種于滅菌后的發酵罐中，在不通氣、微氮氣壓力和慢攪拌下30℃培養80h，再于攪拌和低通氣的條件下培養88h。

整個發酵過程中需要補糖，并用氨水維持pH為6.5。

二、1：的提取

1.過濾水解

菌體與e結合比較牢固并包埋于菌體內部，通過過濾獲得菌體，然后加酸、加熱，水解破壞菌體，釋放出u.

2.提取

對.的溶解能力比水強，與丁歐混溶形成的混合物與水不互溶，經充分攪拌后，：從水相轉入苯-丁醇相并與水被此分層而分離。

3.水提

向苯的-丁醇混合液中加入三氯甲燒后，三者混合，使苯的對.的溶解能力降低而使其在水相中的分配較高，三氯甲燒加得越多，2轉入水里越容易。充分攪排混合，使有機相與水相互不相溶面分層分離。

4.我化

的CN能吸附和取代類似1分子中的Fe和其他基團，使之全部轉化為氰鉆胺素（1u）

5.-三氯甲就提取

與恭酚-丁酵溶劑提取相似，只不過用代替丁醇后改善了有機溶劑對a的選擇性溶解。

6.二次水提

丁醇、加入-溶液中，適當提高了溶劑對蛋白質等雜質的溶解程度。

7.酸化

調pH至3.5~4.0，沉淀除去部分酸性不溶物。

8.色語

利用不同物質對三氧化二鋁具有不同的吸附能力以達到分分離的目的，從而得到高純度的z。

9.結品

1：不溶于純丙鬧，但溶于含水丙酮，當向原液（50%含水丙酮）中不斷加入純丙酮時，原液中水的含量相對減少，.的溶解度逐漸降低，直到過飽和狀態，降低溫度后：不斷結晶析出。

三、思考題

1.什么是維生案？根據溶解性質不同，維生素可分為哪兩大類？各包括哪些？

2.目前，工業生產維生素的方法有哪幾種？請簡要說明。

3.簡述利用阿氏假囊酵母發辭生產.的工藝流程。在發酵的預處理中加入3-羥基-2-襲甲酸鈉的目的是什么？

4.目前，利用微生物發酵法生產的維生素有哪些？

5.根據的結構特點，說明它的生理功能。

6.簡述萊氏法發酵生產的工藝流程。

7.我發明的兩步發酵法，指的是哪兩步？兩步反應的底物和產物各是什么？催化第二步反應的微生物是什么？說明兩步發酵法生產的優點。

8.在1a的發酵生產中，常采用的菌種有哪幾種？

9.簡述從、發酵廢液中提煉12的工藝流程。

10.用薛氏丙酸桿菌發酵生產1a時，常采用兩階段發酵法，兩階段指的是哪兩個階段？若利用薛氏丙酸桿菌發酵生產a，如何提煉？

項目4核酸類藥物發酵技術