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營養(yǎng)缺陷型突變株由于發(fā)生了喪失某種酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長。用這種菌株在定條件下培養(yǎng),可以有目的地積累些中間產(chǎn)物或未端代謝物。對于直線式代謝途徑,選育未端代謝物營養(yǎng)缺陷型菌株可以積累中間產(chǎn)物。
例如,可用酮戊二酸短桿菌(Brevibacterium ketoglutamicum)營養(yǎng)缺陷型菌株來生產(chǎn)L。對于分支式代謝途徑,情況比較復(fù)雜,可以根據(jù)分支途徑的代謝調(diào)節(jié)模式和目的產(chǎn)物在代謝途徑中位置來選育不同的營養(yǎng)缺陷型菌株。例如,對于順序反饋調(diào)節(jié)的途徑,如果目的產(chǎn)物是D,可以選育F和雙重營養(yǎng)缺陷型突變株,使其同時喪失D向E和C向G的轉(zhuǎn)化能力,在補充F和的培養(yǎng)基中,該突變株可以積累D。對于協(xié)同反饋調(diào)節(jié)的途徑,如果目的產(chǎn)物是C,可以選育E營養(yǎng)缺陷型突變株,使其喪失C向D的轉(zhuǎn)化能力,由于G的積累會抑制C向F的轉(zhuǎn)化,只需供應(yīng)E,就會造成中間產(chǎn)物C的積累。
對于累積反饋調(diào)節(jié)的途徑,如果目的產(chǎn)物是D,選育E和G雙重營養(yǎng)缺陷型突變株,使D向E和C向F的轉(zhuǎn)化能力同時喪失,在供應(yīng)E和G的情況下,能積累中間產(chǎn)物D。營養(yǎng)缺陷型菌株也可以用于積累未端代謝物,E、G對于A向B的轉(zhuǎn)化過程具有協(xié)同反饋抑制作用,如果目的產(chǎn)物是E,則可選育G營養(yǎng)缺陷型突變株,使其喪失C向F的轉(zhuǎn)化能力,再供應(yīng)G,由于G含量很低,僅僅E的積累不會對代謝途徑產(chǎn)生反饋抑制,故能大量積累目的產(chǎn)物E。
目前,營養(yǎng)缺陷型突變株的應(yīng)用十分廣泛,尤其是在氨基酸、核苷酸等初代謝產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)中。另外,營養(yǎng)缺陷型突變株在些次代謝產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)中也有應(yīng)用。例如,利用賴氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株來生產(chǎn)。由于合成的底物--a氨基己二酸也是賴氨酸合成的底物,賴氨酸的積累會反饋抑制a氨基己二酸的合成,從而影響到的合成。可以選育賴氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株,使其喪失利用a氨基己二酸合成賴氨酸的能力,再通過供應(yīng)賴氨酸以控制細胞中賴氨酸的濃度,解除其對a氨基己二酸合成的反饋抑制,使大量生成的a氨基己二酸被用于的合成,從而使的產(chǎn)量得以提高。