目的：建立一套適用的培養(yǎng)操作規(guī)程，進(jìn)行無(wú)感染條件(tiáo jiàn)下體外細(xì)胞(cell)擴(kuò)大培養(yǎng)。
主體內(nèi)(in vivo)容：
操作步驟（procedure)：
1、紫外燈照射超凈工作(gōng zuò)臺(tái)30分鐘（根據(jù)實(shí)際情況(Condition)，可適當(dāng)增加或縮短照射時(shí)間，但時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)總比時(shí)間短一點(diǎn)安全(security)。）
2、將培養(yǎng)液、PB
　　
　　S、放在37℃水浴中溫育（每次用多少，溫育多少，這樣既可節(jié)約(jié yuē)溫育的時(shí)間，又可延長(zhǎng)藥品的使用期限。生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器。所有類(lèi)型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過(guò)濾器。）
3、超凈工作(gōng zuò)臺(tái)照射30分鐘后，關(guān)閉紫外，打開(kāi)照明(illumination)，打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再次進(jìn)入細(xì)胞(cell)培養(yǎng)室。壓力蒸汽滅菌器是應(yīng)用**早、效果**可靠、使用**廣泛的一種物理滅菌方法。（注意(attention)：要打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再進(jìn)行操作控制，這樣才能保證循環(huán)（continue)的風(fēng)是無(wú)菌的。同時(shí)還會(huì)避免有菌的風(fēng)直接吹到人的呼吸道中，對(duì)人體也有一定的保護(hù)作用）
4、戴上口罩及手套(gloves)（有條件的**好戴上帽子，不過(guò)也沒(méi)關(guān)系，我們實(shí)驗(yàn)室就沒(méi)戴）
5、用70-75%的酒精擦試實(shí)驗(yàn)（experiment)物品(article)，然后拿入超凈工作(gōng zuò)臺(tái)中。
6、操作控制時(shí)注意(attention)以下幾點(diǎn)：盡量在酒精（術(shù)語(yǔ)稱(chēng)乙醇）燈火焰附近操作，但如果管子(tube)里有細(xì)胞就要離火焰有一定距離了，否則細(xì)胞要燙死了；不要重復(fù)使用(use)移液管（即吸一次后，就換新的管）；不要在敞開(kāi)的容器上方操作；手上的酒精不要擦太多，否則靠近酒精燈時(shí)容易把手燒到（我想非常多人都有過(guò)被燒的經(jīng)歷吧）；
其實(shí)操作控制是很簡(jiǎn)單的，但一定要仔細(xì)。生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來(lái)保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。尤其是第2步許多人都不注意(attention)，細(xì)胞(cell)平時(shí)放在37℃培養(yǎng)，如果加入的PBS或溫度太低，會(huì)對(duì)細(xì)胞有操傷的，雖然這種損傷短期內(nèi)察覺(jué)不到，但時(shí)間長(zhǎng)了，就會(huì)顯現(xiàn)出來(lái)。