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本發明公開了一種D-甘露糖制備方法，它包括以下步驟：葡萄糖差向異構部分轉化為甘露糖得到兩者混合液，混合液經過三次模擬移動床分離，得到富含甘露糖組分的C1和富含葡萄糖組分的A2、B2、C2，C1經過脫鹽、濃縮、結晶、離心、干燥后得到高純度D-甘露糖。經過*遍模擬移動床分離得到的富含葡萄糖組分的分離液經過膜過濾裝置過濾后，透析液進差向異構，經過第二、三遍模擬移動床分離得到的分離液B2、C2進*遍模擬移動床進行分離。本發明工藝利用了膜分離技術以及模擬移動床的*分離效果，采用冷卻結晶與有機溶劑結晶相結合方式，經過一步結晶、無須經過精制環節直接獲得純度99%以上的晶體制品，工藝簡單，易于生產化。