
本發明提供了一種分離純化轉胺酶的方法,它有效地提高了轉胺酶的比酶活,解決了酶的顏色過深從而影響其應用等問題。本發明僅用一種陽離子交換樹脂分離純化出高純度的轉胺酶,方法簡單,耗時短,收率高,且可大規模制備,放大到工業生產。
一種分離純化轉胺酶的方法,其特征在于具體步驟為:(1)在0?10℃下,用體積為1?5倍樹脂量的濃度為0.02?0.15mol/L的緩沖液平衡陽離子交換樹脂,流速為1/2?3柱體積/小時;(2)用體積為1/50?1/8倍樹脂量的轉胺酶酶活為100?1000U/ml的料液以1/2?2柱體積/小時的流速通入平衡好的陽離子交換柱;(3)用體積為2?5倍樹脂量的濃度為0.02?0.15mol/L的緩沖液以1/2?2柱體積/小時的流速洗脫部分雜質;
(4)再用體積為1/2?5倍樹脂量的洗脫劑濃度為0.1?1mol/L的洗脫液以1/5?2柱體積/小時的流速洗脫轉胺酶;(5)收集所得的洗脫液,經過分子截留量為1000?20000道爾頓的超濾設備進行濃縮,至濃縮后的酶濃縮液體積為濃縮前體積的1/5?1/20;(6)用體積為酶濃縮液體積的1/5?2倍、體積濃度為40% 的*溶液沉降,離心,得到沉淀;(7)將沉淀冷凍干燥,得到高比酶活的轉胺酶成品。

























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