果膠甲酯化程度測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 ?意: 正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質運輸等作用外,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。
測定原理:
果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與 2,4-戊二酮反應顯色,在 412nm 下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與 3,5-二酚反應產生有色物質,在 450nm 下有 吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、酶標儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
酶液提取:
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 蒸餾水,進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混勻后 90℃水浴 2h,冷卻至室溫,10000g4℃離心 10min,取上清待測。
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