焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉移酶(PFP)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉移酶(PFP,EC2.7.1.90)是一種胞質酶,廣泛存在于植物組織中,催化果糖-6-磷酸與果糖-1,6-二磷酸之間的可逆轉化,在光合作用碳代謝中起重要作用。
測定原理:
PFP催化6-磷酸果糖轉化為1,6-二磷酸果糖,它在醛縮酶和磷酸丙糖異構酶的作用下轉變?yōu)?-磷酸甘油醛,再由3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH催化生成3-磷酸甘油酸、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了PFP的活性的高低。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。
酶液提取:
1.組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。
2.細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。
3.液體:直接檢測。
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