葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證的動態平衡方面起著重要的作用。
測定原理:
G6P 催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進一步依次催化 NAD+還原生成 NADH,在 340nm 下測定 NADH 生成速率,即可反映 G6P 活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
1、培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
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