α-(α-AL)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前請取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
淀粉水解酶,包括α-和β-。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機(jī)催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
測定原理:
淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖,還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),在540 nm有吸收峰;通過測定540 nm吸光度增加速率,計(jì)算活性。α-AL耐熱,但是β-可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
粗酶液提取:
組織:稱取0.1~0.2g樣本(建議稱取約0.1g樣本),加1 mL蒸餾水勻漿;將勻漿倒入離心管中,在室溫下放置提取15min,每隔5min振蕩1次,使其充分提取;3000g,25℃離心10min,吸取上清液并且加蒸餾水定容至10 mL,搖勻,即為原液。
血清(漿):直接檢測。
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