多酚氧化酶(PPO)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。
測定原理:
PPO能夠催化鄰苯二酚產生醌,后者在525nm有特征光吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備:
或培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)或果汁樣本的處理:
按照血清(漿)或果汁體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)或果汁加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
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