總巰基測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
生物體內(nèi)巰基主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。測定原理:
巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有 吸收峰。自備實(shí)驗(yàn)用品:
天平、研缽、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。試劑組成和配制:
試劑一:液體40 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體2 mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品的制備:
1.按照組織質(zhì)量(g):水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。2.血清,培養(yǎng)液:稀釋5倍后測定,可取0.1mL樣本,加入0.4mL蒸餾水,混勻,置冰上待測。
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