(PRO)含量測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
Pro廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,逆境條件下,植物體內Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強的品種往往積累較多的。因此,增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。
測定原理:
用磺基水楊酸(SA)提取Pro,加熱處理后,Pro與酸性茚三酮溶液反應生成紅色;加甲苯萃取后,在520nm測定吸光度。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯50mL、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測定的準備:
1、細胞或組織樣品的制備:
培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);之后置95℃水浴振蕩提取10min;10000g,25℃離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),勻漿;之后置95℃水浴振蕩提取10min;10000g,25℃離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL提取液),充分混勻,之后置95℃水浴振蕩提取10分鐘,10000g,25℃離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
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