γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測定測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
γ-GT是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解,產(chǎn)生鹽,在細胞外中起了重要的作用。
測定原理:
γ-GT催化谷氨酰對硝基中γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移給N-甘氨酰,生成對硝基,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm光吸收增加速率,來計算γ-GT酶活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
2. 按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。
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