NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙-酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果-酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存。；
試劑一：液體60mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存； 臨用前加入50mL試劑一充分振蕩，溶解待用，用不完的試劑分裝后-20度保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入6mL蒸餾水充分振蕩，溶解待用，用不完的試劑分裝后-20度保存，禁止反復(fù)凍融。
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