超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST-8法)
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化超氧化物陰離子發生岐化作用,生成H2O2 和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系統中具有重要作用。
測定原理:
通過及氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-),O2-可與 WST-8 反應產生水溶性染料甲臜,后者在 450nm 處有吸收;SOD 可O2-,從而抑制了甲臜的形成;反應液黃色越深,說明 SOD 活性愈低,反之活性越高。
需自備的儀器和用品:
酶標儀、離心機、移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備:
或培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
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