磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
PEPC(EC 4.1.1.31)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮-酸與二氧-化-碳-反應生成草酰乙酸呈不可逆反應的酶,對三羧酸循環的運轉起重要作用。
測定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮-酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,蘋果-酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋-果-酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算PEPC活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體30 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑二:液體10 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑三:粉劑×2支,-20℃保存,臨用前加入4mL蒸餾水充分溶解待用;現配現用。
試劑四:粉劑×1支,-20℃保存,臨用前加入5mL蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑五 :原液20μL×1支,4℃保存;
試劑五:稀釋液10mL×1瓶,4℃保存;
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