亞急性毒性試驗又稱亞慢性毒作用，環境污染物在人或動物生命的十分之一左右的時間內，每日或反復多次作用于機體所引起的損害作用。環境污染物的亞急性毒作用，主要是通過亞急性動物毒性試驗來確定的。試驗的目的是在急性毒性試驗的基礎上，確定受試物的主要毒作用，并對受試物的無作用量和中毒閾劑量作出初步估計，同時了解受試物有無蓄積作用和作用的靶器官。進入機體各器官的環境污染物在靶器官中的蓄積量將首先達到引起損害的劑量或濃度。亞急性毒性試驗可為慢性毒性試驗的實驗設計提供依據。亞急性毒性試驗，指染毒期不長(一般為3個月)，或接觸毒物時間不長(數10天乃至數月)對機體引起功能和(或)結構的損害。
常以毒性反應、毒性劑量、受損靶器官、無作用水平及病理組織學變化等描述亞急性毒性試驗。一般由亞急性毒性試驗結果提供這類資料。亞急性毒性試驗是介于急性毒性與慢性毒性之間的一種毒性表現，有時也難以劃定明確的界限。
亞急性毒性試驗所用劑量較大（一般為半數致死量的1/10至1/80），動物年齡較輕，故病理變化比較迅速和明顯。這些特點使亞急性毒性試驗成為環境毒理學研究的重要手段。
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