
常用的滅菌(fungus)方法
1、熱力滅菌(Sterilization):利用高溫使菌體蛋白(protein)質(zhì)變性或凝固(solidification),代謝發(fā)生障礙, 導(dǎo)致細(xì)菌死亡。包括:
(1)焚燒法:用火焚燒,是很*(thorough)的滅菌方法,適用于廢棄的感染物品和有傳染性的動物尸體等。
(2)燒灼法:直接再火焰上燒灼,用于接種環(huán)(針)和試管口或瓶口的滅菌(Sterilization)。生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實驗室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過濾器。
(3)干烤法:在干烤箱通電后利用高熱空氣(Basin air)進(jìn)行滅菌。生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實驗室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過濾器。一般加熱160-170℃, 維持2小時即可殺滅包括芽胞在內(nèi)的一切微生物。主要用于玻璃器皿、 磁器或需干燥(dry)的注射器等。
(4)煮沸法:煮沸100℃5分鐘可殺死細(xì)菌的繁殖體,一般消毒(disinfection)以煮沸10分鐘為宜。如需要殺死芽胞則要煮沸1-3小時。主要用于一般外科器械、注射器、膠管和食具等的消毒。
(5)間歇滅菌(fungus)法:是利用反復(fù)多次的流通蒸汽, 殺死細(xì)菌所有繁殖體和芽胞(界:細(xì)菌界)的一種滅菌法。生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實驗材料時,用來保護(hù)操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的。本法適用于耐熱物品,也適用于不耐熱(<100℃)的一些物質(zhì)如某些培養(yǎng)基的滅菌。具體做法是將待滅菌的物品置于阿諾氏流通蒸汽滅菌器內(nèi),100℃加熱15-30分鐘殺死其中的細(xì)菌繁殖體,然后將物品置37℃溫箱中過夜,使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再通過(tōng guò)流通蒸汽加熱,如此連續(xù)三次,可將所有繁殖體和芽胞全部殺死。若有某些物品不耐100℃,則可將溫度降**75-80℃, 每次加熱的時間延長**30-60分鐘, 次數(shù)增**3次以上,也可達(dá)到滅菌目的,如用血清凝固器對血清培養(yǎng)基或卵黃培養(yǎng)基的滅菌。
(6)巴氏消毒法:由巴斯德創(chuàng)建,常用于牛奶和酒類的消毒。一般加熱61.1-62.8℃半小時, 或71.7℃經(jīng)15-30秒鐘, 便可達(dá)到殺死病原菌或一般雜菌, 而不嚴(yán)重破壞物品的質(zhì)量的目的。
(7)壓力蒸汽滅菌器與蒸汽壓力滅菌器法:是滅菌效果**好、目前應(yīng)用**廣的滅菌方法(method)。利用蒸汽壓力滅菌器或者壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行滅菌,由于密閉容器加溫所產(chǎn)生的高壓飽和水蒸汽能獲得比較高的溫度,通常在1.05kg/cm2的壓力下, 溫度達(dá)121.3℃, 維持15-30分鐘, 可殺死包括特殊結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛芽胞(界:細(xì)菌界)在內(nèi)的所有微生物(Micro-Organism)。此法適用于高溫和不怕潮濕物品的滅菌,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械、注射器、手術(shù)衣、敷料和橡皮手套等。
在同樣溫度下, 蒸汽壓力滅菌器和壓力蒸汽滅菌器的滅菌效果比干熱滅菌好, 原因是:
A、濕熱中菌體吸收水份, 蛋白(protein)質(zhì)較易凝固。
B、濕熱比干熱的穿透力好, 這主要是由于水或飽和(saturation)水蒸汽傳導(dǎo)熱能的效率明顯高于空氣。蒸汽容易穿透到物體的深部, 使滅菌的物體內(nèi)部溫度迅速上升。
C、蒸汽有潛熱存在。每一克水在100℃時, 由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)可放出529卡的熱量。當(dāng)蒸汽與被滅菌(Sterilization)的物體接觸時凝結(jié)成水, 放出潛熱, 能迅速提高(滅菌物體的溫度。
2、紫外線滅菌(Sterilization):紫外線殺菌原理是通過干擾細(xì)菌DNA的合成, 波長2650-2660A殺菌力**強。紫外線作用的特點是
(1)穿透力弱,只能用于房間空氣、物體表面消毒(disinfection);
(2)殺菌效果與照射時間, 距離和強度(strength)有關(guān);
(3)對眼睛角膜和皮膚(skin)有損傷作用,工作人員(personnel)切勿在紫外線(Ultraviolet rays)燈照射下進(jìn)行操作控制。
日光中含有大量紫外線。將病人的被褥、衣服、書報等放在強烈的日光下爆曬數(shù)小時, 可達(dá)到消毒的目的。