測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。測(cè)定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 肼作用生成丙酮酸腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：30mL×1瓶， 4℃保存；
試劑一：液體15 mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存，用時(shí)加入10μL試劑五和1.3 mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑三：液體15 mL×1瓶，4℃保存；
試劑四：液體50 mL×1瓶，4℃保存；
試劑五：液體100μL×1支，4℃保存；
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