3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)濃度的維持和的發(fā)生密切相關(guān),在機(jī)體糖、脂、紊亂中發(fā)揮重要作用。
測定原理:
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機(jī)磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。
需自備的儀器和用品
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品的制備:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.血清、果汁等液體樣品可直接測定。
3.提取物(或者)可配制成一定濃度,如5 mg/mL。
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