吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
試劑組成和配制:
試劑一:液體60 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體6 mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體6 mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存,用時加入25 mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周;
試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存,用時加入25 mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周;
試劑六:液體25mL×1瓶,室溫保存;
試劑七:10mmol/L標準磷貯備液10mL×1瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標準磷應用液配制:將試劑七 20倍稀釋,即取 0.1mL試劑七加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:按H2O: 試劑四:試劑五:試劑六=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑現用現配。
注意:配試劑 用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
測定方法: 分光光度法
測定規格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中代謝因其初始底物不同,分為( Glu) 和( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以為前體合成途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。測定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內產生無機磷的量可確定P5CS活性。需自備的儀器和用品:
可見外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。試劑組成和配制:
試劑一:液體60 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體6 mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體6 mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存,用時加入25 mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周;
試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存,用時加入25 mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周;
試劑六:液體25mL×1瓶,室溫保存;
試劑七:10mmol/L標準磷貯備液10mL×1瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標準磷應用液配制:將試劑七 20倍稀釋,即取 0.1mL試劑七加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:按H2O: 試劑四:試劑五:試劑六=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑現用現配。
注意:配試劑 用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
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