氨基酸(AA)含量測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
動物肝臟、是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化能反應肝、腎的生理狀態。另外,氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況。植物體內氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養狀況等有重要意義。測定原理:
氨基酸的α -氨基可與水合茚三酮反應,產生藍紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過測定570 nm吸光度,來計算氨基酸含量。
自備儀器及用品:
臺式離心機、水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。2.培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
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