測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
LAP是一類能水解肽鏈N-末端為的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量為豐富。各類患者因肝細胞損傷,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的檢測能從不同側面反映各種的發生和發展。測定原理:
LAP分解L-亮氨酰對硝基生成對硝基,后者在405nm有 吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算LAP活性。自備用品:
酶標儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
1、細胞或組織樣品的制備:或培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為1000~5000:1的比例(建議2000萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
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